יש שני מנהגים לגבי תכני הלימוד בליל שבועות:
א - הלומד בוחר ללמוד מה שליבו חפץ.
ב - מנהג התיקון שתוקן על ידי המקובלים, דהיינו: שלושה פסוקים ראשונים ואחרונים של כל הפרשיות וכן מספרי נביאים וכתובים. (ויש קוראים בשלימות את מעמד הר סיני ועשרת הדברים), משנה ראשונה ואחרונה של כל מסכת (ויש שלא לומדים משנה), תרי"ג מצוות, מדרשים על מתן תורה, אידרא רבה וקטעים מהזוהר.

מנהג לימוד ליל שבועות חל על אנשים ולא לנשים.
הרב מרדכי אליהו פסק שאם רוצות ללמוד תנ"ך וכ' תבוא עליהן ברכה (וראה גם שו"ת רב פעלים א).